運用圓二色光譜(CD)和熒光光譜法(FS),探討茶葉兒茶素(EGCG)對胰脂肪酶(PPL)二級和三級結(jié)構(gòu)的變化規(guī)律;同時,以橄欖油為底物,研究反應時間和EGCG濃度對胰脂肪酶活性的影響。結(jié)果表明:EGCG對PPL的抑制作用1h后達到最大值,抑制率為30%。EGCG低濃度(≤1mmol/L)時,EGCG對PPL的抑制率隨EGCG濃度升高而增大,當EGCG超過此濃度時,抑制率隨EGCG濃度的升高基本保持不變。Lineweaver-Burk作圖可知,EGCG對PPL的抑制類型為非競爭性抑制作用。CD和FS分析表明,EGCG對PPL二級和三級結(jié)構(gòu)均有一定的影響,PPL二級結(jié)構(gòu)的變化與EGCG濃度呈正相關(guān),而三級結(jié)構(gòu)的變化與EGCG濃度沒有顯著的相關(guān)性。FS圖譜還表明,EGCG對PPL色氨酸存在熒光淬滅現(xiàn)象,且靜態(tài)淬滅和動態(tài)淬滅同時存在。
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