目的:對(duì)采用堿處理-胃酶水解方法分離的藍(lán)鯊軟骨Ⅱ型膠原蛋白的物理化學(xué)特性進(jìn)行研究。方法:藍(lán)鯊軟骨經(jīng)冷凍干燥粉碎,順次用堿處理、胃蛋白酶限制性水解、鹽析和透析獲得Ⅱ型膠原蛋白。采用SDS-PAGE、氨基酸成分分析、紫外光譜掃描和差示掃描量熱法對(duì)提取的Ⅱ型膠原蛋白進(jìn)行鑒定。結(jié)果:藍(lán)鯊Ⅱ型膠原蛋白由分子質(zhì)量為130kD的α1鏈構(gòu)成,甘氨酸是藍(lán)鯊Ⅱ型膠原蛋白含量最高的氨基酸為356‰,富含丙氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸,且肽鏈氨基酸殘基具有Gly-X-Y的構(gòu)成特點(diǎn),藍(lán)鯊Ⅱ型膠原蛋白在226nm波長(zhǎng)處有紫外吸收峰,變性溫度為41℃。結(jié)論:采用堿處理-限制性酶水解分離得到藍(lán)鯊Ⅱ型膠原蛋白,具有Ⅱ型膠原蛋白的典型特征。
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