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速凍食品中沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌多重PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 152 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 滕要輝,索 標(biāo),艾志錄,謝新華,潘治利
關(guān)鍵詞: 速凍食品;多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);檢測(cè);沙門(mén)氏菌;金黃色葡萄球菌
摘要:

為實(shí)現(xiàn)速凍食品中沙門(mén)氏菌(Salmonella spp.)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè),首先優(yōu)化多重PCR擴(kuò)增的反應(yīng)條件,比較基因組DNA提取方法,結(jié)果表明:退火溫度采用60℃、各引物濃度200nmol/L及擴(kuò)增循環(huán)35次,本多重PCR檢測(cè)技術(shù)可以有效地將沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌同時(shí)檢出,檢測(cè)特異性為100%。3種DNA提取方法中試劑盒法純度最高,檢出限分別是31、26DNA copies/reaction。經(jīng)過(guò)在人工污染致病菌的速凍水餃中應(yīng)用試驗(yàn)后,該多重PCR方法經(jīng)過(guò)4h的增菌培養(yǎng)即可從速凍水餃中同時(shí)檢測(cè)出起始菌落數(shù)低至100CFU/g的沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌。

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