為了提高蛹蟲草多糖的抗氧化活性,采用α-淀粉酶對蛹蟲草多糖進行酶法修飾。以DPPH自由基清除率為響應(yīng)值,運用響應(yīng)面分析法對α-淀粉酶修飾蛹蟲草多糖的工藝進行優(yōu)化,研究酶修飾后蛹蟲草多糖清除DPPH自由基、螯合Fe2+和還原力等抗氧化活性,并對其三螺旋體結(jié)構(gòu)進行分析。結(jié)果表明:對修飾多糖抗氧化活性的影響因素從大到小依次為:加酶量、酶解溫度、酶解pH值;α-淀粉酶修飾蛹蟲草多糖的最優(yōu)工藝條件為:酶解溫度48.5℃、酶解pH 5.8、加酶量259.5U/g,在此條件下,酶修飾后蛹蟲草多糖對DPPH自由基的清除率預測值為81.4%,驗證值為(81.6±1.6)%,結(jié)果重現(xiàn)性好,可用于實際預測。抗氧化實驗表明,α-淀粉酶法修飾后,蛹蟲草多糖清除DPPH自由基和螯合Fe2+的EC50值分別為:0.0247、1.0120mg/mL,分別比酶法修飾前提高了55.1%和39.8%;同時,蛹蟲草多糖的還原力也得到了顯著提高(P<0.05)。三螺旋體結(jié)構(gòu)分析表明,蛹蟲草多糖經(jīng)α-淀粉酶修飾后,其三螺旋體結(jié)構(gòu)有輕微破壞,但仍然保持三螺旋體結(jié)構(gòu)。
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