目的:建立慶大霉素獸藥殘留的懸液芯片直接競(jìng)爭(zhēng)檢測(cè)法,并同時(shí)與常規(guī)酶聯(lián)免疫法進(jìn)行比較。方法:將慶大霉素單克隆抗體與表面帶有羧基的聚苯乙烯微球通過(guò)酰胺鍵偶聯(lián)形成檢測(cè)探針,利用碳二亞胺法將慶大霉素與藻紅蛋白偶聯(lián)后形成酶標(biāo)物,采用直接競(jìng)爭(zhēng)法,在液相體系中慶大霉素與藻紅蛋白酶標(biāo)物競(jìng)爭(zhēng)性與單克隆抗體相結(jié)合,反應(yīng)后通過(guò)熒光信號(hào)獲得慶大霉素競(jìng)爭(zhēng)曲線。同時(shí)進(jìn)行慶大霉素直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法曲線的測(cè)定。對(duì)兩種方法在檢出限、檢測(cè)區(qū)間以及加樣回收率方面進(jìn)行比較。結(jié)果表明:懸液芯片IC10、IC50分別為0.1、2.8ng/mL,檢測(cè)區(qū)間為0.1~100ng/mL,酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法IC10、IC50為0.27、1.95ng/mL,檢測(cè)區(qū)間為0.1~10ng/mL。兩種方法在牛奶、雞肉、雞肝、豬肉和豬肝中的回收率均在80%~120%之間。另外,懸液芯片法與其他氨基糖苷類抗生素基本無(wú)交叉反應(yīng),特異性良好。結(jié)論:懸液芯片系統(tǒng)具有操作簡(jiǎn)單,靈敏度高以及特異性良好等特點(diǎn),與傳統(tǒng)經(jīng)典的農(nóng)獸藥殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)法相比,具有一定的優(yōu)勢(shì),從而為農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)提供了新的檢測(cè)技術(shù)。
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