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應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測(cè)肉及肉制品中5種致病菌
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 144 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 祝儒剛,李拖平,*,宋立峰
關(guān)鍵詞: 肉及肉制品|多重PCR|致病菌|基因芯片
摘要:

建立一種運(yùn)用多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合基因芯片技術(shù)檢測(cè)大腸埃希氏菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌和單核細(xì)胞增生李斯特菌5種食源性致病菌的快速、準(zhǔn)確、靈敏的方法。分別選取編碼大腸埃希氏菌的slt基因、沙門氏菌invA基因、金黃色葡萄球菌nuc基因、志賀氏菌ipaH基因和單核細(xì)胞增生李斯特菌inlA基因,并以細(xì)菌16S rDNA基因作為陽(yáng)性對(duì)照,設(shè)計(jì)引物和探針,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物與含特異性探針的芯片雜交。結(jié)果表明:該基因芯片可同時(shí)特異性地檢測(cè)5種致病菌,多重PCR檢測(cè)靈敏度為20pg,而DNA芯片檢測(cè)靈敏度可達(dá)2pg;用所制備的基因芯片檢測(cè)實(shí)際肉及肉制品樣品,準(zhǔn)確率高于傳統(tǒng)培養(yǎng)法。所建立的基因芯片檢測(cè)方法特異性好、靈敏度高,可為食源性致病菌的檢測(cè)提供理想手段。

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