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β-1,3-葡聚糖酶基因克隆、表達及抗菌活性的研究
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 113 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 李鎮(zhèn)剛,趙愛春,王茜齡,金筱耘,李 軍,余茂德*
關(guān)鍵詞: Glu基因|cDNA|原核表達|植物真菌病|基因克隆
摘要:

通過RT-PCR的方法分別從小麥和水稻的cDNA中克隆獲得β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu基因),分別命名為TaGlu9507和OsGlu30。它們的序列分析表明這兩個克隆均含一個1002bp的開放閱讀框(ORF),編碼334個氨基酸,各自的N-端含有一個長20和29個氨基酸殘基的信號肽序列。將不含信號肽序列的TaGlu9507和OsGlu30編碼區(qū)DNA片段分別克隆進pET28-a(+)表達載體,并轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)0.5mmol/L IPTG誘導(dǎo)3h后獲得了高量表達,表達量分別占大腸桿菌可溶性蛋白的49.7%和26.7%,表達產(chǎn)物對黑曲霉、酵母等真菌生長均有較為明顯的抑制作用。本結(jié)果更進一步表明β-1,3-葡聚糖酶基因是植物真菌病防治的潛在目的基因群之一。

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