目的:分離純化葛根抗氧化肽并對(duì)其進(jìn)行體外清除自由基活性的研究。方法:以野生葛根為實(shí)驗(yàn)材料,經(jīng)30%的乙醇浸提、透析、冷凍干燥,進(jìn)一步采用DEAE陰離子交換層析,反相高效液相色譜的方法,對(duì)葛根抗氧化肽進(jìn)行純化,對(duì)不同組分進(jìn)行還原能力的測(cè)定,還原能力最強(qiáng)的命名為PE1。對(duì)PE1進(jìn)行茚三酮反應(yīng)和分子質(zhì)量測(cè)定。采用鄰苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反應(yīng)法檢測(cè)PE1體外對(duì)超氧陰離子自由基、DPPH自由基、羥自由基的清除作用。結(jié)果:反相高效液相色譜檢測(cè)PE1純度,顯示為單一峰,PE1與茚三酮反應(yīng)呈陽(yáng)性,分子質(zhì)量約為746D,PE1在體外可以有效清除以上3種自由基。在質(zhì)量濃度為0.652mg/mL時(shí),羥自由基清除率可達(dá)到80.01%;在5mg/mL質(zhì)量濃度條件下,對(duì)超氧陰離子自由基的清除率高達(dá)97.35%;在3.5mg/mL質(zhì)量濃度條件下,對(duì)DPPH自由基的清除率達(dá)到75.02%,其IC50為2.83mg/mL。結(jié)論:PE1具有較強(qiáng)的清除自由基活性。
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