為了獲得較高酶活力的嗜酸乳桿菌細(xì)胞壁蛋白酶(CEP),對(duì)嗜酸乳桿菌CEP的提取方法進(jìn)行優(yōu)化。經(jīng)過比較超聲波破碎法、Ca2+-free法、溶菌酶裂解3種方法,確認(rèn)溶菌酶裂解法結(jié)合使用非離子清潔劑破壁是提取嗜酸乳桿菌CEP的最佳方法。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用正交試驗(yàn)對(duì)嗜酸乳桿菌CEP的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,得出嗜酸乳桿菌CEP的最佳提取方法:用裂解液(50mmol/L Tris-HCl、100mmol/L NaCl、TritonX-100添加量1%、1.5mg/mL溶菌酶,pH 7.8)懸浮菌體(20mL/g),37℃保溫3h,4℃、4500r/min離心20min,取上清液。溶菌酶裂解法提取CEP過程中各因素對(duì)CEP提取效果的影響依次為:溶菌酶質(zhì)量濃度>裂解pH值>TirtonX-100添加量>保溫時(shí)間。
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