以天然苦蕎過敏蛋白包被聚苯乙烯微孔板,以鼠抗人IgE抗體標(biāo)記辣根過氧化物酶,以間接酶聯(lián)免疫吸附法(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,IELISA)檢測病人血清中的特異性抗體,分析并建立關(guān)鍵操作步驟及反應(yīng)條件。結(jié)果表明:ELISA反應(yīng)的最適工作條件為包被的抗原質(zhì)量濃度100μg/mL、陽性血清稀釋度1:50、酶標(biāo)二抗稀釋度1:1000,37℃時(shí)封閉的最佳時(shí)間為40min,包被抗原與陽性血清中抗體的最佳作用時(shí)間為40min,陽性血清與酶標(biāo)二抗的最佳作用時(shí)間為40min。本方法具有良好的特異性、重復(fù)性和精密度。
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