目的:建立快速簡便地檢測產(chǎn)酪胺糞腸球菌(Enterococcus faecalis)和屎腸球菌(Enterococcus faecium)的PCR方法。方法:將糞腸球菌和屎腸球菌的酪氨酸脫羧酶基因與GenBank數(shù)據(jù)庫中已公布的細(xì)菌的酪氨酸脫羧酶基因進(jìn)行比對,根據(jù)它們的非保守序列,分別設(shè)計(jì)糞腸球菌和屎腸球菌的特異性引物,建立檢測產(chǎn)酪胺糞腸球菌和屎腸球菌的PCR方法。結(jié)果:根據(jù)非保守序列,分別設(shè)計(jì)糞腸球菌和屎腸球菌的特異性引物,用27株細(xì)菌對這兩對引物分別進(jìn)行反復(fù)驗(yàn)證,結(jié)果顯示,所設(shè)計(jì)的兩對引物都只對其目的菌株產(chǎn)生特異性擴(kuò)增,對其他菌株沒有擴(kuò)增,方法的檢測限可達(dá)到1.0×102CFU/mL。結(jié)論:本方法具有良好的特異性、穩(wěn)定性和靈敏性,可用作食品中產(chǎn)酪胺糞腸球菌和屎腸球菌的檢測。
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