目的:建立同步速測(cè)食品中沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生性李斯特菌的多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)方法。方法:利用基因組比對(duì)法尋找3種致病菌的特異性序列--沙門氏菌的invA基因、金黃色葡萄球菌的nuc基因和單增李斯特菌的prs基因,運(yùn)用Primer Premier 5.0分別設(shè)計(jì)3對(duì)片段大小不同的特異性引物;通過優(yōu)化反應(yīng)體系,建立3種致病菌的多重PCR檢測(cè)體系。結(jié)果:建立的多重PCR方法靈敏度測(cè)試結(jié)果分別為7.6、3.8、5.1pg/μL,在此靈敏度下可以擴(kuò)增出全部特異性引物條帶,驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)相應(yīng)的目的條帶且未發(fā)生交叉影響。結(jié)論:初步建立能同步、簡(jiǎn)便、快速、靈敏地檢測(cè)食品中沙門菌、金黃色葡萄球菌和單核細(xì)胞增生性李斯特菌的三重PCR方法。
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