依據(jù)Enterocin A的氨基酸序列,設(shè)計半胱氨酸替換突變體Enterocin A(C14S)和Enterocin A(C47W),通過大腸桿菌表達系統(tǒng)獲得重組突變體。用還原劑β-巰基乙醇處理MBP-Enterocin A。采用瓊脂擴散實驗檢測重組Enterocin A、突變體及還原產(chǎn)物的抗無害李斯特菌LIN3活性。結(jié)果表明:N末端融合部分不含有半胱氨酸的MBP-Enterocin A或His tag-Enterocin A均表現(xiàn)強抗菌活性;而N末端融合部分含有半胱氨酸的GST-Enterocin A,表現(xiàn)很弱的抗菌活性;半胱氨酸替換突變體及MBP-Enterocin A還原產(chǎn)物均不顯示抗菌活性。實驗結(jié)果證明二硫鍵為Enterocin A活性的重要影響因素。
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