通過環(huán)氧氯丙烷和高碘酸鈉依次對纖維素進行環(huán)氧化和雙醛氧化,制得環(huán)氧化雙醛氧化纖維素。以環(huán)氧化雙醛氧化纖維素為載體固定化β-半乳糖苷酶,研究固定化酶的制備條件、酶學性質及微觀結構。結果表明:固定化時間4h,固定化pH6.5,m酶:m載體=1:15時,固定化酶的活力最高為0.528U/g。與游離酶相比,β-半乳糖苷酶經(jīng)過固定化后最適反應溫度升高,熱穩(wěn)定性和耐酸堿性增強,米式方程分析表明,β-半乳糖苷酶經(jīng)固定化后與底物的親和力增加,固定化酶重復使用5次后,相對酶活力為64%。紅外光譜和掃描電鏡對固定化酶的微觀結構研究表明,環(huán)氧化雙醛氧化纖維素的環(huán)氧基和醛基與β-半乳糖苷酶的氨基發(fā)生共價反應形成固定化酶。
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