領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
設(shè)計(jì)4個(gè)乳源性免疫活性肽的目的基因后，利用基因重組技術(shù)成功構(gòu)建原核表達(dá)載體pTYB11，并將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到E.coli BL21中，通過(guò)改變異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 (IPTG)的濃度、培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)溫度，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)來(lái)優(yōu)化乳源活性小肽的IPTG誘導(dǎo)表達(dá)條件，使目的蛋白可在E.coli BL21中高效表達(dá)。依據(jù)15% SDS-PAGE電泳分析得到融合蛋白的表達(dá)量，選出最適誘導(dǎo)條件為IPTG終濃度0.1～0.2mmol/L，在12～15℃條件下培養(yǎng)20h，得到大小為59.2kD左右的融合目的蛋白，其表達(dá)量可占總蛋白表達(dá)量的40%，經(jīng)Western Blotting鑒定正確。
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