以康寧木霉為出發(fā)菌株,利用N+注入技術(shù)進行誘變選育,采用響應面法對誘變菌株HF-6產(chǎn)纖維素酶的發(fā)酵條件進行優(yōu)化。結(jié)果顯示:菌體的存活率隨注入劑量的增加呈“馬鞍型”曲線,注入劑量在(10~12.5)×1014ions/cm2區(qū)域內(nèi)有高的正突變率。在注入能量為15keV、注入劑量為12.5×1014ions/cm2條件下,篩選得到1株遺傳穩(wěn)定性良好的高產(chǎn)菌株HF-6,其產(chǎn)纖維素酶活力穩(wěn)定在0.217U/mL左右,較出發(fā)菌株提高52.82%;用Plackett-Burman設計法篩選出影響產(chǎn)纖維素酶的3個重要因素:pH值、裝液量及硫酸銨質(zhì)量濃度,通過響應面分析Box-Behnken設計法對篩選出的因素進行優(yōu)化評價,得到濾紙酶活與3個因素的最優(yōu)回歸方程。通過驗證實驗,確定濾紙酶活最大時的最佳組合:pH5.75、硫酸銨質(zhì)量濃度4.23g/L、裝液量63mL/250mL,此時酶活可達0.233U/mL。
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