為得到高產(chǎn)超氧化物歧化酶(SOD)的菌株,通過稀釋平板法從土壤中進(jìn)行SOD生產(chǎn)菌株分離和篩選,利用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)染色法鑒定SOD,采用抑制劑實驗分析SOD類型,利用生理生化性質(zhì)分析和16S rDNA親緣關(guān)系分析進(jìn)行種屬鑒定,并進(jìn)一步研究碳源、氮源、碳氮比、接種量和裝液量對發(fā)酵產(chǎn)酶的影響。結(jié)果表明:SOD活性染色顯示一條條帶,說明只產(chǎn)一種SOD同工酶。該SOD對氯仿-乙醇敏感,對H2O2不敏感,為Mn-SOD。理化性質(zhì)和16S rDNA序列分析初步鑒定該菌為腸桿菌科沙雷氏菌屬。發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果表明產(chǎn)酶最佳條件為:最佳碳源為玉米粉,最佳氮源為蛋白胨,碳氮比4:1,接種量8%,250mL三角瓶裝液量70mL。
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