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孔雀石綠人工抗原的合成及多克隆抗體的制備
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 158 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王 梅,徐乃豐,劉麗強,匡 華,林 菲,宋珊珊,王澤路,胥傳來
關(guān)鍵詞: 孔雀石綠|人工抗原|多克隆抗體|ELISA
摘要:

通過研究孔雀石綠(MG)抗原的合成和多克隆抗體的制備,探索研究食品中孔雀石綠殘留的檢測方法。本實驗先合成含有羧基的孔雀石綠半抗原(CMG),并用液-質(zhì)聯(lián)用法進行分析鑒定。半抗原經(jīng)重氮化法處理后分別偶聯(lián)兩種載體蛋白BSA和OVA,并通過紫外分光光度法進行鑒定。與CMG標準品和兩種載體蛋白的紫外吸收光譜相比,偶聯(lián)物的吸收峰發(fā)生了明顯的偏移,計算得免疫原的偶聯(lián)比為10.6:1,說明偶聯(lián)成功。通過免疫制備多克隆抗體,并通過間接ELISA法對CMG抗血清的效價進行檢測,并進一步檢測抗體的特異性,兩只兔子的IC50值分別為8.1ng/mL和4.6ng/mL。

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