為探究氨介導(dǎo)宰后牦牛肉中低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表達(dá)對(duì)線粒體細(xì)胞凋亡及肌肉嫩度的影響。以10 mmol/L氯化銨(NH4Cl)、0.9%生理鹽水(對(duì)照)和10 mmol/L N-硝基-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽(N-nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride,L-NAME)3 種溶液處理的牦牛背最長(zhǎng)肌為研究對(duì)象,通過測(cè)定HIF-1α表達(dá)量、NO含量、能量代謝酶活力、ATP水平、細(xì)胞凋亡線粒體途徑及肌肉嫩度等相關(guān)指標(biāo),探討宰后牦牛肉細(xì)胞凋亡與嫩度變化的機(jī)制,完善宰后牦牛肉成熟過程中細(xì)胞凋亡與嫩度變化理論體系。結(jié)果表明:在宰后牦牛肉成熟過程,各處理組HIF-1α表達(dá)量、NO含量總體呈現(xiàn)先增加后減少趨勢(shì),Na+-K+-ATPase與Ca2+-ATPase活力、細(xì)胞凋亡酶9(Caspase-9)與細(xì)胞凋亡酶3(Caspase-3)活力和剪切力呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。ATP含量、線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)開放程度、線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,MMP)及肌纖維直徑和面積隨成熟時(shí)間延長(zhǎng)呈現(xiàn)逐漸下降趨勢(shì),而肌原纖維小片化指數(shù)(myofibril fragmentation index,MFI)與肌細(xì)胞間隙呈現(xiàn)逐漸增大趨勢(shì)。宰后6~24 h,NH4Cl組HIF-1α表達(dá)量和NO含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),L-NAME組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。宰后6~72 h,NH4Cl組ATP含量顯著高于對(duì)照組與L-NAME組。宰后6~24 h,對(duì)照組Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活力顯著高于NH4Cl組(P<0.05),顯著低于L-NAME組(P<0.05)。宰后6~120 h,NH4Cl組MPTP開放程度顯著小于對(duì)照組(P<0.05),L-NAME組顯著大于對(duì)照組(P<0.05)。宰后0~168 h,NH4Cl組MMP下降47.72%,對(duì)照組下降53.54%,L-NAME組下降60.05%。宰后6~72 h,NH4Cl組Caspase-9與Caspase-3活力顯著低于對(duì)照組(P<0.05),L-NAME組Caspase-9與Caspase-3活力顯著高于對(duì)照組(P<0.05);宰后6~120 h,NH4Cl組剪切力、肌纖維面積與直徑大于對(duì)照組,MFI和肌纖維間隙小于對(duì)照組,L-NAME組則相反。綜上,隨著牦牛肉宰后成熟,氨通過上調(diào)HIF-1α表達(dá)進(jìn)而使Na+-K+-ATPase與Ca2+-ATPase活力下降、ATP含量增加,從而調(diào)控肌細(xì)胞能量代謝,維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定;通過抑制MPTP開放以及MMP下降,降低Caspase-3/9活力,抑制線粒體細(xì)胞凋亡發(fā)生,進(jìn)而引起剪切力增大、MFI減小以及肌細(xì)胞形態(tài)變化,最終對(duì)牦牛肉嫩度產(chǎn)生負(fù)面影響。
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