用地衣芽孢桿菌發(fā)酵液制備彈性蛋白酶粗酶液,采用硫酸銨分級沉淀和Sephadex凝膠柱層析的方法分離純化彈性蛋白酶,并對彈性蛋白酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究。結(jié)果表明:彈性蛋白酶粗酶液經(jīng)40%~70%飽和度的硫酸銨純化后比活力提高到120U/mg,經(jīng)凝膠柱層析純化后比活力可達(dá)到292U/mg,純化倍數(shù)為12.6,SDS-PAGE法證實(shí)彈性蛋白酶分子質(zhì)量為29.5kD。對酶學(xué)性質(zhì)的研究結(jié)果表明:彈性蛋白酶最適反應(yīng)溫度為55℃,最適反應(yīng)pH值為7.4,以剛果紅-彈性蛋白為底物,米氏常數(shù)Km為9.67mg/mL。低濃度金屬離子Ca2+和K+對酶活力有促進(jìn)作用,而Mg2+、Mn2+、Zn2+和Al3+對酶活力則有抑制作用。
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