目的:建立一種能同時檢測肉中金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、沙門氏菌和單核增生李斯特菌的多重PCR檢測方法。方法:根據(jù)金黃色葡萄球菌的耐熱核酸酶基因(nuc)、沙門氏菌的侵襲蛋白基因(invA)、志賀氏菌的侵襲性質粒抗原基因(ipaH)和單核細胞增生性李斯特菌的內化素基因(inlA)設計引物,通過優(yōu)化好的反應體系進行多重聚合酶鏈反應(PCR)擴增目的基因。結果:特異性實驗結果表明4種菌均能在相應位置擴增出特異性條帶。對污染4種菌的豬肉進行檢測,確定出金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的檢出限是102CFU/mL,志賀氏菌和單核增生李斯特菌的檢出限是101CFU/mL。結論:本實驗建立的多重PCR方法比傳統(tǒng)細菌檢測方法更特異、快速、靈敏,適用于肉中金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、沙門菌和單核增生李斯特菌的快速檢測。
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