采用大容量(250×4mL)低速(5300×g)離心機分離β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白,進行堿溶條件、酸沉條件等條件的研究。結(jié)果表明:提取蛋白的堿性溶液(pH8.5的Tris-HCl溶液)離心效果較佳,沉淀大豆球蛋白pH6.4為佳,沉淀β-伴大豆球蛋白pH4.8為佳,用pH5.0沉淀雜蛋白離心分離效果較好;每一個待離心的濁液,在離心之前4℃冷藏2h以上,對離心效果的提高十分有效;采用最佳條件,從300g脫脂豆片分離大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,收率分別為6.8%和2.2%,用SDS-PAGE電泳實驗方法測定大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白樣品純度分別為89.1%和78.9%。因此該低速離心法較適合數(shù)十克級別的β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白的分離。
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