目的:建立應(yīng)用基因芯片結(jié)合酪胺信號放大法檢測食源性疾病病原菌的方法。方法:針對細(xì)菌16S和23S rDNA基因設(shè)計各種病原菌診斷的特異性探針和通用引物。被檢測的病原菌經(jīng)過生物素標(biāo)記的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后與制備的基因芯片探針區(qū)雜交,再用酪胺-Cy3進(jìn)行顯色。最后通過熒光掃描儀掃描雜交圖像。結(jié)果:建立的基因芯片檢測方法用于診斷沙門菌、志賀菌、副溶血性弧菌、空腸彎曲菌、腸出血性大腸桿菌O157:H7、單增李斯特菌、霍亂弧菌、臘樣芽孢桿菌等8種細(xì)菌性傳染病病原菌。純培養(yǎng)物的檢測靈敏性達(dá)到5×102CFU/mL,對20例模擬雙盲樣本進(jìn)行檢測,結(jié)果與預(yù)期的完全相符。結(jié)論:本方法特異性強、靈敏度高,可以用于傳染病防控和臨床診斷等多個領(lǐng)域。
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