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—— 中國(guó)食品雜志社
用AS.1398 中性蛋白酶酶解制備壇紫菜(Porphyra haitanesis)ACE 抑制肽，并經(jīng)超濾膜、Sephadex G-15 凝膠層析和反相高效液相色譜(RP-HPLC)分離純化，純化產(chǎn)物測(cè)定其氨基酸組成，并運(yùn)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)測(cè)定分子質(zhì)量。結(jié)果顯示：壇紫菜酶解液經(jīng)超濾分離獲得分子質(zhì)量小于2000D 的組分ACE 抑制活性最高，IC50 為0.73mg/mL；該組分進(jìn)行Sephadex G-15 凝膠層析分離得6 個(gè)組分，組分E 的IC50 最小，為0.67mg/mL。組分E 經(jīng)RP-HPLC 分離得峰6 對(duì)ACE 的抑制率最高，達(dá)到89.54%；峰6 再次過(guò)RP-HPLC，又洗出2 個(gè)蛋白峰，說(shuō)明峰6 并不是單一物質(zhì)，還需進(jìn)行多次反復(fù)純化。測(cè)定峰6 的氨基酸組成主要含有Tyr、Val 和Phe，同時(shí)采用MALDI-TOF-MS 分析發(fā)現(xiàn)有8 個(gè)主要的質(zhì)子峰，信號(hào)最強(qiáng)的質(zhì)子峰為m/z 861.17，有4 個(gè)峰聚集在m/z 860 左右，說(shuō)明峰6 平均分子質(zhì)量大約為860D，推算出紫菜降血壓肽含有3 個(gè)Val、2 個(gè)Phe、1 個(gè)Tyr，N 端為Val，可能的排序順序有18 種。
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