為建立肉鴨加工中快速、準(zhǔn)確的沙門氏菌PCR 檢測方法,并應(yīng)用于肉鴨屠宰生產(chǎn)加工鏈沙門氏菌的實時監(jiān)測。采用Primer Premier 5.0 軟件針對沙門氏菌特有的fimY 基因設(shè)計合成一對引物5'- GCATTCCGCTCATTAGAT-3'和5'-TGGAGGCTGATAACAAGG-3',并對沙門氏菌DNA 擴(kuò)增PCR 體系的退火溫度、引物濃度、Mg2+ 濃度和聚合酶濃度進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:成功擴(kuò)增出沙門氏菌標(biāo)準(zhǔn)株和分離株的2 7 5b p 目的片段,靈敏度達(dá)到了1.2pg;應(yīng)用建立的PCR 方法對國內(nèi)某典型肉鴨屠宰廠的肉鴨屠宰鏈環(huán)節(jié)進(jìn)行沙門氏菌污染的檢測,發(fā)現(xiàn)在屠宰環(huán)境、拔毛浸燙水、浸蠟冷卻水、清洗池水、宰前毛、食道、糞便和瀝水體腔內(nèi)共有25 個樣品中擴(kuò)增出了275bp大小的特異性片段,而空白對照無擴(kuò)增條帶。
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