目的:構(gòu)建連接乳酸菌胞外蛋白水解酶基因的非抗性重組質(zhì)粒。方法:以瑞士乳桿菌基因組DNA 為模板,克隆胞外蛋白水解酶基因,連接到以thyA 為選擇壓力的非抗性穿梭表達載體pW425et 上,構(gòu)建重組質(zhì)粒pW425et-R,轉(zhuǎn)化入thyA 基因缺陷型E.coli X13 感受態(tài)細胞,SDS-PAGE 電泳檢測顯示該水解酶得到了表達。結(jié)果:成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pW425et-R,胞外蛋白水解酶基因在E.coli X13 中得到正確表達。結(jié)論:成功地表達了乳酸菌胞外蛋白水解酶基因,可為進一步制備具降血壓功能基因工程乳酸菌提供參考。
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