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高山紅景天中糖基轉(zhuǎn)移酶家族cDNA全長基因的克隆
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 111 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 于寒松,張繼星,李彥舫,馬蘭青 ,胡耀輝
關(guān)鍵詞: 糖基轉(zhuǎn)移酶|基因克隆|cDNA 末端快速克隆法(RACE)|高山紅景天
摘要:

為了獲得高山紅景天中紅景天苷生物合成關(guān)鍵酶-- UDP- 糖基轉(zhuǎn)移酶家族基因的全長cDNA 序列,采用在線簡并引物設(shè)計(jì)軟件結(jié)合3'-RACE 技術(shù)獲得兩個(gè)糖基轉(zhuǎn)移酶基因的3'端部分序列,進(jìn)一步采用不同的5'-RACE試劑盒擴(kuò)增兩個(gè)基因的5'端序列,結(jié)果顯示利用Takara 公司的試劑盒擴(kuò)增可以得到cDNA全長序列(GenBank登錄號(hào)為EF508689 和EU567325),而采用Invitrogen 公司的試劑盒得到的序列不包括全部開放讀碼框。實(shí)驗(yàn)證明,利用Takara 公司的SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit 克隆獲得基因全長序列的比率更高。

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