為了探討深度開發(fā)泥鰍蛋白制備功能性肽的可能性,采用比色法研究泥鰍肉酶解物對Fenton 體系產(chǎn)生的羥自由基的清除效果,從復(fù)合風(fēng)味蛋白酶、復(fù)合蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、菠蘿蛋白酶5 種酶中,篩選出菠蘿蛋白酶作為酶解泥鰍肉制備具有清除羥自由基活性酶解物的適宜水解酶。用響應(yīng)面分析法(RSM)對該酶的酶解條件進(jìn)行優(yōu)化,并采用Sephadex G-15 凝膠層析測定最佳酶解條件下制得的酶解液中活性肽的相對分子質(zhì)量分布。結(jié)果表明,菠蘿蛋白酶的最佳酶解條件為:固液比1:4、加酶量0.2%、pH6.47、溫度54.48℃、酶解時間59.97min,酶解物對羥自由基的清除率為99.03 %,IC50 值為0.57mg/mL。酶解液中活性肽的相對分子質(zhì)量范圍為1129~2344。
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