領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
建立沙丁胺醇的直接競爭ELISA(dcELISA)快速檢測方法，采用高碘酸鈉法制備辣根過氧化物酶標(biāo)記沙丁胺醇單克隆抗體，棋盤滴定法確定包被抗原質(zhì)量濃度和抗體稀釋倍數(shù)，通過單因素試驗，考察反應(yīng)體系中表面活性劑、離子濃度、甲醇體積分?jǐn)?shù)、pH 值因素對dcELISA 性能的影響，確定最優(yōu)檢測條件，同時考察方法的特異性。結(jié)果表明：酶標(biāo)抗體克分子比為2.1 時偶合物的滴度最高，最佳反應(yīng)條件為包被抗原質(zhì)量濃度1μg/mL，酶標(biāo)抗體稀釋2560 倍，0.01mol/L、pH7.4 的磷酸鹽抗體稀釋液(PBS)中含體積分?jǐn)?shù)0.05% 的Tween-20、0.5mol/L NaCl溶液和體積分?jǐn)?shù)5% 的甲醇時dcELISA 具有最高的靈敏度和最好的穩(wěn)定性，所建立方法的IC50 為10.3ng/mL，檢測限為0.049ng/mL，線性范圍0.3～76.30ng/mL，批內(nèi)變異系數(shù)13.8%，批間變異系數(shù)為22.38%，與克倫特羅交叉反應(yīng)率為321.18%，與溴布特羅交差反應(yīng)率為29.09%，與其他結(jié)構(gòu)類似物沒有明顯交叉反應(yīng)。本研究所建立的dcELISA 可用于沙丁胺醇和克倫特羅的多殘留檢測。
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