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食品中三種致病李氏菌MPCR-DHPLC檢測方法的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 178 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 王 耀,曹際娟,*,閆平平,曹遠(yuǎn)銀
關(guān)鍵詞: 復(fù)合PCR- 變性高效液相色譜法(MPCR-DHPLC)|單核細(xì)胞增生李斯特菌|綿羊李斯特菌|英諾克李斯特菌|檢測
摘要:

應(yīng)用復(fù)合PCR(multiplex PCR,MPCR)結(jié)合變性高效液相色譜(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技術(shù)建立食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌、綿羊李斯特菌和英諾克李斯特菌的快速高通量檢測方法。根據(jù)單核細(xì)胞增生李斯特菌、綿羊李斯特菌和英諾克李斯特菌的特異基因序列分別設(shè)計(jì)引物,MPCR擴(kuò)增的產(chǎn)物經(jīng)DHPLC 技術(shù)進(jìn)行快速檢測。以94 株參考菌株做特異性實(shí)驗(yàn),并開展了重現(xiàn)性檢測實(shí)驗(yàn)。MPCRDHPLC方法同步檢測到單核細(xì)胞增生李斯特菌、綿羊李斯特菌和英諾克李斯特菌的特異性陽性吸收峰,未檢測到李斯特菌屬其他近源種和非近源種參考菌株的陽性吸收峰,且重現(xiàn)性良好。該方法具有很好的特異性,可以快速、準(zhǔn)確、高通量地檢測食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌、綿羊李斯特菌和英諾克李斯特菌,是食品微生物快速檢測的新技術(shù)。

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