采用熱水浸提法,通過一系列單因素試驗(yàn),研究提取時間、提取pH 值、提取溫度和液料比對球等鞭金藻胞內(nèi)和胞外多糖提取的影響。在此基礎(chǔ)上,通過正交試驗(yàn)進(jìn)一步優(yōu)化胞內(nèi)和胞外多糖的提取工藝。最后,采用適宜提取工藝制備胞內(nèi)和胞外粗多糖樣品,并測定該樣品中蛋白質(zhì)和多糖含量。單因素試驗(yàn)結(jié)果表明,提取時間、提取pH 值和提取溫度均能顯著影響胞內(nèi)和胞外多糖的提取。對胞內(nèi)粗多糖提取率而言,提取時間180min、提取pH9 和提取溫度70℃為最適宜的提取條件;當(dāng)提取時間300min、提取pH10 和提取溫度80℃時,更利于胞外粗多糖的提取。液料比對胞內(nèi)和胞外粗多糖提取的影響較小,20:1(mL/g)為多糖提取合適的液料比;正交試驗(yàn)結(jié)果表明,胞內(nèi)(胞外)多糖的適宜提取工藝為提取時間、提取pH 值、提取溫度和液料比分別為180min(240min)、pH8(9)、70℃和15:1。粗多糖樣品的蛋白質(zhì)和多糖含量分別為1.18%(0.82%)和 22.1%(18.6%),很低的蛋白質(zhì)含量和較高的多糖含量表明采用該提取工藝獲得的粗多糖樣品純度較高,利于樣品的后續(xù)分離純化。
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