目的:獲得庫拉索蘆薈過氧化氫酶純品并對其性質(zhì)進行研究。方法:采用硫酸銨分級沉淀,DEAESepharose陰離子交換層析,CM-Sepharose 陽離子交換層析和Sephacryl S-200 凝膠層析對酶蛋白進行分離純化,采用SDS-PAGE 鑒定酶的純度、分子質(zhì)量。結(jié)果:從蘆薈中分離純化獲得電泳純的過氧化氫酶,純化倍數(shù)為228.05倍,酶活力回收率為14.10%,比活力達17427.30U/mg。該酶的分子質(zhì)量為239.90kD,亞基分子質(zhì)量為60.60kD。推測該酶由4 個相同亞基構(gòu)成。該酶最適溫度為45℃,最適pH 值為7.5,以過氧化氫為底物測定該酶的表觀Km 為34mmol/L。結(jié)論:成功分離純化獲得過氧化氫酶,該酶具有良好的熱穩(wěn)定性和酸堿耐受性。
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