設(shè)計(jì)間接競爭ELISA 方法,并優(yōu)化二抗稀釋比、競爭時(shí)間、PBS 溶液的pH 值3 個(gè)條件參數(shù)。優(yōu)化后的地塞米松、倍他米松、雙氟米松3 種抗體的間接競爭ELISA 曲線的IC50 分別為2.66、7.36、6.12ng/ml。通過3 種抗體的交叉反應(yīng)來評估其群選特性。結(jié)果表明,地塞米松抗體的群選性最強(qiáng),對雙氟米松的交叉反應(yīng)率高達(dá)120%、倍他米松73%、曲安息龍37%、潑尼松龍21%,而對其他3 種內(nèi)源性類糖皮質(zhì)激素交叉反應(yīng)率均小于0.1%,然后地塞米松以0.375、0.75、1.5、3.0ng/g 分別添加到雞肉樣本中測定回收率,所得回收率在61.3%~80.3% 之間,變異系數(shù)小于15%。在實(shí)際樣本檢測中,將ELISA 方法的測定結(jié)果與LC-MS 的結(jié)果進(jìn)行比較,兩者具有很好的相關(guān)性。
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