為了篩選分泌有機(jī)溶劑穩(wěn)定性蛋白酶耐有機(jī)溶劑極端微生物,利用添加苯10%(V/V)的MLB培養(yǎng)液從油污染水樣中分離獲得有機(jī)溶劑耐受菌株56株。通過(guò)產(chǎn)蛋白酶篩選培養(yǎng)基(SMA 培養(yǎng)基)平板初篩和搖瓶發(fā)酵復(fù)篩從中篩選獲得蛋白酶高產(chǎn)菌株DS1。通過(guò)形態(tài)學(xué)、生理生化及16S rDNA序列(genbank EU578329)構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)將菌株DS1鑒定為Bacillus aquaemaris。該菌株能耐受多種有機(jī)溶劑,并可以分泌有機(jī)溶劑穩(wěn)定性蛋白酶。該蛋白酶在 25%極性常數(shù)(logPOW)大于等于1.8的有機(jī)溶劑中穩(wěn)定性好,于30℃、140 r/min,培養(yǎng)14d仍有70%以上的活力。菌株DS1及其所分泌的蛋白酶均能較好的耐受有機(jī)溶劑,可以進(jìn)行有機(jī)相催化,具有潛在的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。
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