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青霉菌B01 產(chǎn)菊粉酶特性的研究及菊粉酶系分析
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 127 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 魏 微,劉兆普,*,王 琳,隆小華
關(guān)鍵詞: 菊粉酶|酶學(xué)性質(zhì)|活性聚丙烯酰胺凝膠電泳|薄層層析|高效液相色譜
摘要:

研究了pH 值、溫度、底物濃度、金屬離子對(duì)青霉菌(Penicillium sp.)B01 所產(chǎn)胞外菊粉酶活性的影響以及酶活隨反應(yīng)時(shí)間的變化情況。結(jié)果表明,pH4.6 時(shí)菊粉酶活力最大,最適反應(yīng)溫度是55℃。在pH3.6~5.4 的范圍內(nèi),60℃以下酶活較穩(wěn)定。Ca2+ 對(duì)菊粉酶有激活作用,而Cu2+ 對(duì)其活性強(qiáng)烈抑制。采用活性聚丙烯酰胺凝膠電泳法(PAGE)對(duì)該酶粗液進(jìn)行蛋白質(zhì)分析,獲得較清晰的6 條蛋白譜帶;2,3,5- 氯化三苯基四氮唑(TTC)活性染色結(jié)果顯示,只有3 條譜帶表現(xiàn)為具有菊粉酶活性。對(duì)酶解產(chǎn)物用薄層層析(TLC)和高效液相色譜(HPLC)法的分析結(jié)果,進(jìn)一步證實(shí)這3 條譜帶具有菊粉酶活性,并確定其主要為外切型菊粉酶,產(chǎn)物主要為果糖。

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