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抗雞蛋清提取物單克隆抗體的制備與鑒定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 130 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 許靜, 傅穎媛, 劉志剛, 李佳娜
關(guān)鍵詞: 蛋清提取物; 單克隆抗體; 特性鑒定;
摘要:

目的:制備和鑒定小鼠抗雞蛋清提取物單克隆抗體。方法:以純化后的蛋清提取物為免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾細胞與小鼠骨髓瘤NS-1細胞融合。通過間接ELISA法篩選可特異性分泌抗蛋清提取物McAb的雜交瘤細胞。采用Ig類與亞類鑒定試劑盒鑒定McAb的Ig類與亞類;通過間接ELISA、Western Blotting鑒定McAb的特異性。結(jié)果:獲得2株可穩(wěn)定分泌抗蛋清提取物McAb的的雜交瘤細胞,分別命名為5E12和4F1,其分泌的McAb均為IgG1。Western Blotting分析表明,McAb 4F1所識別的靶分子的相對分子質(zhì)量(Mr)約為44kD。間接ELISA法檢測兩株McAb5E12、4F1的凍融前后效價分別為1:3000、1:300。結(jié)論:成功制備了兩株抗蛋清提取物McAb、5E12和4F1,為變應(yīng)原的提取、純化及鑒定提供了有效的實驗基礎(chǔ)。

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