為研究羧甲基普魯蘭多糖螯合鈣的功效,以天然普魯蘭多糖為原料,通過(guò)羧甲基化反應(yīng)合成水溶性羧甲基普魯蘭多糖(carboxymethyl pullulan,CMP),隨后利用CMP與鈣溶液反應(yīng)制備CMP-Ca(II)配合物,通過(guò)紫外光譜、傅里葉變換紅外光譜和掃描電子顯微鏡對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,以滴定法測(cè)定的CMP-Ca(II)中鈣離子質(zhì)量分?jǐn)?shù)為指標(biāo),采用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化CMP-Ca(II)制備條件,最后建立骨質(zhì)疏松Balb/C小鼠模型,利用CMP-Ca(II)干預(yù),通過(guò)測(cè)定骨質(zhì)量、骨密度和骨硬度等指標(biāo)研究CMP-Ca(II)對(duì)骨質(zhì)疏松小鼠的補(bǔ)鈣效果。紫外光譜和傅里葉變換紅外光譜分析結(jié)果表明,CMP中羧基和羥基與鈣離子發(fā)生螯合。經(jīng)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化得到的最佳CMP-Ca(II)制備條件為Ca2+與CMP質(zhì)量比2∶1、反應(yīng)液pH 10、溫度50 ℃;在此條件下,可制得鈣離子質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10.3%的CMP-Ca(II)。骨質(zhì)疏松小鼠經(jīng)CMP-Ca(II)干預(yù)后,骨質(zhì)量、骨密度和骨硬度提高,血清堿性磷酸酶活力降低,表明CMP-Ca(II)能夠調(diào)節(jié)骨質(zhì)疏松小鼠的鈣吸收能力,緩解骨質(zhì)疏松,改善小鼠骨骼狀況。本實(shí)驗(yàn)可為合成和開(kāi)發(fā)新型CMP-Ca(II)補(bǔ)鈣制劑提供參考。
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