領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為實(shí)現(xiàn)抗真菌性能的耐熱新型幾丁質(zhì)酶在食品防腐及生物防治方面的應(yīng)用，從產(chǎn)黃青霉Xch23中分離純化幾丁質(zhì)酶（Chi-Pc76）并研究其應(yīng)用特性。通過硫酸銨沉淀、DEAE-Cellulose A52離子交換層析和Sephadex G-100凝膠過濾層析純化得到均一的Chi-Pc76。最終得到Chi-Pc76純化倍數(shù)17.1 倍，回收率21.6%，比活力為584.8 U/mg。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)得Chi-Pc76分子質(zhì)量61 kDa。純化后的Chi-Pc76最佳反應(yīng)條件為pH 6.0、溫度55 ℃。Chi-Pc76在寬泛的pH 4.0～10.0之間穩(wěn)定性強(qiáng)，其顯著的熱穩(wěn)定性可達(dá)到70 ℃。Chi-Pc76對(duì)底物膠體幾丁質(zhì)具有高的底物特異性，對(duì)乙二醇幾丁質(zhì)、α-幾丁質(zhì)、β-幾丁質(zhì)有中等活性，而對(duì)其他受試底物無活性或痕量活性。以膠體幾丁質(zhì)為底物Km和Vmax值分別為0.25 mg/mL和20 μmol/（min·mg）。金屬離子Ca2＋、Ba2＋、K＋、Na＋對(duì)酶有明顯激活作用；十二烷基硫酸鈉、吐溫80、苯甲基磺酰氟和尿素對(duì)酶活力基本無影響，但Mn2＋、Co2＋、Fe2＋、Ag＋、Cu2＋、Zn2＋、Pb2＋、Hg2＋和β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇均對(duì)酶活力有抑制作用。Chi-Pc76對(duì)黑曲霉、黃曲霉、尖孢鐮刀菌和橘青霉均有顯著的抗真菌活性，對(duì)比文獻(xiàn)為產(chǎn)黃青霉抗真菌幾丁質(zhì)酶。鑒于Chi-Pc76純化簡(jiǎn)便、熱穩(wěn)定性好、寬廣的pH值穩(wěn)定性、高效降解幾丁質(zhì)和抗真菌等特點(diǎn)，產(chǎn)黃青霉Xch23幾丁質(zhì)酶在幾丁質(zhì)廢料綜合利用、生物轉(zhuǎn)化藥理活性產(chǎn)品、食品保鮮以及植物病原性真菌和昆蟲幼蟲生物防治等方面具有潛在價(jià)值。
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