為提高新篩選的羅伊氏乳桿菌LTR1318冷凍干燥過程中的抗凍性能,通過單因素試驗先篩選出影響乳酸菌凍干存活率的4 個主要因素:脫脂乳、谷氨酸、低聚果糖和山梨糖醇。再利用Box-Behnken試驗設計不同保護劑組合下的菌株凍干存活率為訓練集和測試集,構建徑向基函數(shù)人工神經(jīng)網(wǎng)絡模型,模型擬合度可達0.984 4。結合遺傳算法對神經(jīng)網(wǎng)絡的擬合結果進行50 次迭代尋優(yōu)后,得到的最佳保護劑配方為脫脂乳10.90%、谷氨酸1.20%、低聚果糖1.30%和山梨糖醇0.80%。驗證此條件下的凍干存活率為(95.74±5.07)%。經(jīng)過人工神經(jīng)網(wǎng)絡結合遺傳算法優(yōu)化保護劑組合的策略,菌株在凍干過程中的乳酸脫氫酶和β-半乳糖苷酶的酶活力分別提高了53.19%和3.53 倍,是正常培養(yǎng)條件下酶活力的78.25%和86.43%。此外,冷休克蛋白基因的相對表達量小幅上調(diào)8.29%。通過采取上述策略,本研究探索出一種新型益生菌的凍干工藝,為乳酸菌凍干制劑的制備和真空冷凍干燥技術的進一步應用提供參考和指導。
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