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豆粕血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽的結(jié)構(gòu)鑒定及作用機(jī)制解析
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 163 發(fā)表時間: 2021-07-13
作者: 劉靜波,王子秦,于一丁,張婷,劉博群
關(guān)鍵詞: 大豆粕;血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽;分離純化;分子對接;活性口袋
摘要:

以大豆粕為原材料,利用超聲輔助酶解技術(shù)、超濾-?KTA層析相結(jié)合的方法分離純化獲取豆粕酶解產(chǎn)物中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,對其分子質(zhì)量分布進(jìn)行研究,后通過質(zhì)譜分析與分子對接技術(shù)鑒定并篩選出ACE抑制活性肽的氨基酸序列,經(jīng)固相合成肽序列,檢測其ACE抑制肽的活性并基于分子對接技術(shù)探索其抑制機(jī)制。結(jié)果表明:經(jīng)超聲輔助酶解提取獲得的豆粕肽分子質(zhì)量主要分布在6 000 Da以下;根據(jù)分子對接的最低預(yù)測自由能篩選出的GVRP(-8.44 kcal/mol)和IIVTP(-9.04 kcal/mol)可以抑制ACE活性,半抑制濃度(50% inhibitory concentration,IC50)分別為(84±0.06)、(77±0.08)μmol/L;分子對接結(jié)果表明:GVRP、IIVTP能夠與ACE的活性口袋S1、S1′、S2形成氫鍵相互作用,共有的過近接觸(3.5 ?范圍內(nèi))ACE氨基酸殘基為His513、Ala354和Glu384。本研究基于串聯(lián)質(zhì)譜與分子對接技術(shù),建立從混合多肽中快速鑒定、篩選活性多肽的方法,探究活性多肽與ACE穩(wěn)定結(jié)合并體現(xiàn)其ACE活性的抑制機(jī)制,為后續(xù)的深入研究提供一定參考。

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