目的:探究君遷子葉楊梅苷誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制。方法:噻唑藍(lán)法測定楊梅苷對細(xì)胞存活率的影響;激光共聚焦顯微鏡結(jié)合Hoechst 33342染色觀察楊梅苷對細(xì)胞形態(tài)的影響;流式細(xì)胞分析儀檢測楊梅苷對細(xì)胞凋亡、周期阻滯、胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和單丹璜酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)熒光強(qiáng)度的影響;Western blot檢測楊梅苷對細(xì)胞凋亡和自噬相關(guān)蛋白表達(dá)量的影響。結(jié)果:濃度為10~200 μmol/L的楊梅苷對人正常肝細(xì)胞L-02細(xì)胞無顯著影響(P>0.05),但可顯著降低HepG2細(xì)胞的存活率(P<0.05),促進(jìn)其凋亡,提升ROS水平,增加MDC和細(xì)胞核熒光強(qiáng)度,將細(xì)胞阻滯在G2/M期;此外,可顯著上調(diào)HepG2細(xì)胞中Bax、細(xì)胞色素c、Apaf-1、Caspase-9、Caspase-3、Beclin 1、Atg5和LC3-II的相對表達(dá)量(P<0.05),下調(diào)Bcl-2和LC3-I的相對表達(dá)量(P<0.05)。結(jié)論:楊梅苷具有抗肝癌作用,其機(jī)制與激活線粒體介導(dǎo)的凋亡通路、阻滯細(xì)胞周期、提升ROS水平和促進(jìn)細(xì)胞自噬有關(guān)。實(shí)驗(yàn)可為楊梅苷作為天然抗肝癌藥物的研究及應(yīng)用提供參考。
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