建立了奶粉中可致嬰幼兒高死亡率的阪崎腸桿菌的PCR和熒光PCR檢測方法。利用細(xì)菌16S和23SrDNA的保守區(qū)設(shè)計通用引物,對6株阪崎腸桿菌16S-23SrDNA間區(qū)序列(ITS)進行擴增和測序,在比對阪崎腸桿菌ITS序列的基礎(chǔ)上,設(shè)計了11條PCR和熒光PCR檢測引物,組合成30對PCR引物,并篩選出一對種特異性引物,建立了奶粉中阪崎腸桿菌PCR和熒光PCR檢測方法。用10株阪崎腸桿菌,18株近源菌株驗證實驗表明,本文所建立的PCR和熒光PCR方法特異性強;加菌實驗表明,奶粉樣品中阪崎腸桿菌檢測低限為(2.2~5.4)CFU/100g,靈敏度高;新建的PCR和熒光PCR方法與FDABAM(美國食品及藥品管理局微生物分析手冊)方法比對實驗表明,三種方法的檢測結(jié)果完全一致。由于PCR和熒光PCR檢測方法快速、可靠,因此可替代傳統(tǒng)檢驗方法。
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