為探究羊奶粉在加工過程中金黃色葡萄球菌污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)及菌株的分子特征和耐藥性,對(duì)某羊奶粉加工廠不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行樣本收集,通過采用選擇培養(yǎng)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增nuc基因?qū)瘘S色葡萄球菌進(jìn)行分離鑒定,然后對(duì)分離的菌株進(jìn)行毒素基因(21 種)、耐藥性(16 種常用抗生素)及葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)、多位點(diǎn)序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和脈沖場(chǎng)凝膠電泳(pulsed field gel electrophpresis,PFGE)分型研究。結(jié)果表明,收集的112 份樣本中有6 份樣本被污染(5.4%,6/112),其中包括加工設(shè)備(2 份)、加工人員(2 份)、罐奶(1 份)和車間落地粉(1 份)。所有的分離株至少攜帶1 種毒素基因,其中以pvl基因的攜帶率最高(100.0%,6/6),其次為sea、sec、see、seh、sek和seq(50.0%,3/6),seg、sej和ser(33.3%,2/6),sed、sei、sem和seo(16.7%,1/6)。所有分離株至少耐受4 種抗生素,其中對(duì)氨芐西林、頭孢哌酮、甲氧芐啶/磺胺甲惡唑和青霉素的耐藥性最為普遍(100.0%,6/6),其次為紅霉素和阿莫西林/克拉維酸(83.3%,5/6)、四環(huán)素(50.0%,3/6)和慶大霉素(16.7%,1/6)。此外,所有菌株對(duì)苯唑西林、頭孢西丁、萬古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感。所有分離株共有4 種spa分型和3 種ST分型,其中以ST1-t127(50.0%,3/6)為主,其次為ST5-t002、ST5-t548和ST188-t189(16.7%,1/6)。對(duì)于PFGE分型,可分為3 個(gè)大簇(I、II和III簇)和4 個(gè)基因型(A、B、C和D),其中加工設(shè)備和落地粉存在相同的PFGE分型。研究結(jié)果表明在羊奶粉加工過程中存在金黃色葡萄球菌污染現(xiàn)象,罐奶、加工設(shè)備、加工人員和落地粉是受污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié),且在不同的加工環(huán)節(jié)中存在一定的交叉污染。雖然污染率較低,有必要對(duì)奶廠不同加工環(huán)節(jié)的污染情況進(jìn)行長期調(diào)查,確認(rèn)關(guān)鍵污染環(huán)節(jié),可以有效控制金黃色葡萄球菌在奶粉制品中的擴(kuò)散。
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