膽固醇氧化酶在食品加工、醫(yī)療檢測(cè)、生物抗蟲方面的作用日益受到人們的重視,并且顯示出巨大的應(yīng)用潛力。本實(shí)驗(yàn)著重研究了膜結(jié)合型膽固醇氧化酶的萃取條件及其基本理化特性。10mmol/L磷酸鉀緩沖液,pH7.5+0.5%TritonX-100的萃取液對(duì)胞膜酶的萃取效果最佳,萃取時(shí)間為10min。不含有TritonX-100的極性溶液的萃取效果較差,0.9%NaCl和pH7.5磷酸鉀緩沖液相對(duì)而言具有稍好的萃取效果。酶活力測(cè)定體系中含有1%TritonX-100時(shí)顯色最深,紅色均勻且穩(wěn)定持久,酶活力最高。酶蛋白中存在有含量相當(dāng)高的糖組分,糖含量為3.763mg/ml,蛋白含量為1.106mg/ml,二者之比為3.4:1。酶反應(yīng)的最適pH7.5,酶穩(wěn)定范圍pH5.0~1.0。粗酶的熱穩(wěn)定性較好,40℃以及40℃以下酶活力保持不變。
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