本文研究了在沒有外加堿的pH漸變條件下,用枯草桿菌堿性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)雙酶協(xié)同水解從豬皮膠原蛋白制備寡肽水解物的可行性。考察了單酶單因素水解條件、雙酶加入方式對豬皮降解率和蛋白質(zhì)水解度的影響,并在此基礎(chǔ)上通過正交試驗進一步優(yōu)化出雙酶一次性投料方案下水解豬皮的最佳條件:水解溫度為60℃,堿性蛋白酶加入量為25μl/g蛋白,酸性蛋白酶加入量為4%(g/g),底物濃度為60g/L,水解時間為12h。在上述最佳條件下,新鮮豬皮的降解率可達94.7%,蛋白質(zhì)的水解度可達17.7%,水解物中分子量小于1000(10個氨基酸以下的肽)的寡肽選擇性達到了42.5%。結(jié)果表明,在不外加堿的條件下,采用雙酶協(xié)同水解方法能夠顯著提高豬皮降解率,特別是蛋白質(zhì)水解度。
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