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微生物谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶高產(chǎn)菌株的誘變選育
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 123 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王璋, 王灼維
關(guān)鍵詞: 鏈霉菌|谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶|復(fù)合誘變|NTG|羥胺|
摘要:

以本實驗室篩選的Streptomyces sp.WZFF.W-12(谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶活0.24U/ml)為出發(fā)菌株,孢子經(jīng)預(yù)培養(yǎng)處理處于萌發(fā)狀態(tài)后制備成單孢子懸浮液,用1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍(NTG)單獨和結(jié)合羥胺進(jìn)行多次復(fù)合誘變處理。實驗發(fā)現(xiàn),誘變處理后菌落的形態(tài)變異等特征與產(chǎn)酶能力呈相關(guān)關(guān)系,并被用于最初的突變菌落挑選。接著先后采用蛋白質(zhì)交聯(lián)凝絮-沉淀性能分析的初篩試驗和搖瓶測定酶活的復(fù)篩試驗分離選育高產(chǎn)酶突變菌株,最后獲得一產(chǎn)酶活力達(dá)2.18U/ml的高產(chǎn)菌株W-12var HZ3,酶活相對提高了8倍。對該菌株進(jìn)行分類鑒定方面的理化性能測試和傳代實驗結(jié)果表明,該菌遺傳性較為穩(wěn)定,而且其理化性能與已報道的產(chǎn)酶菌種明顯不同。

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