目的:以低分化和高分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma,PC12)細(xì)胞為研究對象,探究姜黃素抗氧化能力及其可能的作用機(jī)理。方法:通過噻唑藍(lán)法測定PC12細(xì)胞的相對增殖率,然后確定姜黃素的作用濃度及作用時(shí)間;采用2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽法及鐵離子還原/抗氧化能力法測定細(xì)胞的總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC);使用DCFH-DA熒光探針標(biāo)記法測定活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;分別測定細(xì)胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過氧化氫酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力;采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法測定抗氧化酶基因的表達(dá)水平。結(jié)果:10 μmol/L姜黃素作用24 h后,低分化PC12細(xì)胞相對增殖率沒有顯著變化,但高分化細(xì)胞增殖受到顯著抑制(P<0.05);經(jīng)不同濃度姜黃素處理后,兩種細(xì)胞的T-AOC均極顯著提高(P<0.01),ROS水平極顯著降低(P<0.01);進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)姜黃素對SOD、CAT和GSH-Px活力和基因表達(dá)均有一定的促進(jìn)作用。結(jié)論:姜黃素可能通過提高SOD、CAT和GSH-Px的活力和其基因表達(dá)水平增強(qiáng)PC12細(xì)胞T-AOC、降低ROS水平,從而緩解氧化應(yīng)激,維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。
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