目的:研究枯草芽孢桿菌發(fā)酵螺旋藻渣的發(fā)酵液中分離出的抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌機(jī)理。方法:采用紫外分光光度法、鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷法和原子吸收光譜法研究抗菌肽對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜通透性的影響;采用考馬斯亮藍(lán)法、十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和瓊脂糖凝膠電泳考察抗菌肽對(duì)金黃色葡萄球菌胞內(nèi)蛋白合成及對(duì)基因組DNA結(jié)合作用的影響,并通過模擬細(xì)胞膜的疏水環(huán)境探究抗菌肽發(fā)揮抑菌作用時(shí)其二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化情況。結(jié)果:抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素均能引起金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜通透性增加,導(dǎo)致胞內(nèi)鉀離子釋放量、蛋白質(zhì)泄漏量及細(xì)胞膜疏水性增加,但抗菌肽SP-AP-1的抑菌效果更為顯著(P<0.05);兩種抗菌肽均能抑制菌體蛋白合成,尤其對(duì)分子質(zhì)量為17、20、25~35 kDa的蛋白抑制作用最為明顯;雖然兩種抗菌肽對(duì)金黃色葡萄球菌基因組DNA沒有明顯阻滯作用,但增大抗菌肽質(zhì)量濃度,SP-AP-1可與溴化乙錠競爭性結(jié)合DNA,使基因組DNA條帶變暗,影響蛋白質(zhì)的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)為螺旋藻渣抗菌肽拮抗金黃色葡萄球菌的抑菌機(jī)理研究提供了理論參考。
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