目的:建立異鱗蛇鯖、棘鱗蛇鯖實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)檢測(cè)方法。方法:對(duì)比異鱗蛇鯖、棘鱗蛇鯖、大西洋鱈等18 種鱈魚(yú)及易摻假品種的線粒體細(xì)胞色素C氧化酶I(cytochrome C oxidase subunit I,COI)基因,設(shè)計(jì)異鱗蛇鯖、棘鱗蛇鯖物種特異性引物/探針,建立兩種魚(yú)的real-time PCR檢測(cè)方法,評(píng)估其特異性、絕對(duì)靈敏度和相對(duì)靈敏度;用該方法對(duì)50 份市售標(biāo)稱(chēng)“鱈魚(yú)”制品進(jìn)行檢測(cè),評(píng)估其實(shí)際使用效果。結(jié)果:兩種檢測(cè)方法特異性強(qiáng),絕對(duì)靈敏度為0.002 ng/μL(異鱗蛇鯖)和0.000 2 ng/μL(棘鱗蛇鯖),相對(duì)靈敏度均達(dá)0.01%,滿足實(shí)際檢測(cè)需求。在50 份市售樣品中檢出1 份含異鱗蛇鯖成分,1 份含棘鱗蛇鯖成分,與測(cè)序比對(duì)結(jié)果一致。結(jié)論:本研究建立的異鱗蛇鯖和棘鱗蛇鯖源性成分的檢測(cè)方法特異性強(qiáng)、靈敏度高,為保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益和水產(chǎn)品摻雜使假的檢測(cè)提供技術(shù)支持。
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