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鵝骨膠原蛋白鈣螯合肽的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 127 發(fā)表時(shí)間: 2020-12-03
作者: 周名洋,何雨欣,孫楊贏,潘道東,曹錦軒
關(guān)鍵詞: 鵝骨膠原蛋白;鈣螯合肽;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜;氨基酸組成;紫外光譜;傅里葉紅外光譜
摘要:

利用堿性蛋白酶酶解鵝骨膠原蛋白制備鈣螯合肽,通過(guò)SephadexG-25凝膠色譜及反向高效液相色譜對(duì)鈣螯合肽進(jìn)行分離純化,并采用氨基酸自動(dòng)分析儀、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜、紫外吸收光譜(ultro violet spectroscopy,UV)和傅里葉紅外光譜(Fourier transform infrared spectroscopy,F(xiàn)TIR)進(jìn)行氨基酸組成和結(jié)構(gòu)鑒定。經(jīng)鑒定鵝骨膠原蛋白鈣螯合肽富含Glu(12.67%)和Asp(7.47%),氨基酸序列為DSYVGDEAQSKR和KLLDEGR,分子質(zhì)量分別為1 353.62 u和829.47 u。經(jīng)合成驗(yàn)證,DSYVGDEAQSKR和KLLDEGR的鈣螯合能力分別為(70.08±2.20)mg/g和(68.18±1.31)mg/g,UV和FTIR結(jié)果表明DSYVGDEAQSKR和KLLDEGR與鈣離子螯合后,紫外吸收強(qiáng)度降低、酰胺胺I帶和酰胺II帶紅移和N—H鍵藍(lán)移,推測(cè)多肽氨基酸殘基上的羧基和氨基是螯合鈣離子的主要位點(diǎn)。

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